Bài viết này, HUYlab sẽ mang đến cho bạn đọc cái nhìn tổng quan về nuôi cấy mô tế bào. Qua đó, chúng tôi sẽ chia sẻ với các bạn những thông tin hữu ích về xây dựng phòng thí nghiệm nuôi cấy mô sao cho vừa đầy đủ tiện ích, vừa đáp ứng chỉ tiêu an toàn và tối ưu nguồn chi phí.
Contents
Nuôi cấy mô thực vật là gì?
Nuôi cấy mô tế bào là phương pháp tổng hợp nhiều kỹ thuật nhằm nuôi cấy, duy trì cơ quan thực vật hay mô tế bào để có thể sống và phát triển tốt trong điều kiện nuôi cấy vô trùng. Phương pháp nuôi cấy mô tế bào cần được tiến hành với các yếu tố như nước, nhiệt độ, không khí, độ ẩm, mà môi trường dinh dưỡng đạt tiêu chuẩn.
Kỹ thuật nuôi cấy tế bào thực vật
Để tiến hành nuôi cấy mô tế bào hiệu quả, không khí trong môi trường nuôi cấy cần lọc qua HEPA nhằm đáp ứng được điều kiện vô trùng. Thao tác nuôi cấy nên được thực hiện trong tủ cấy đạt chuẩn.
Mẫu cấy (giống cây ban đầu) cần được khử trùng bề mặt trong dung dịch hóa chất phù hợp nhằm loại bỏ các vi sinh vật và các tác nhân gây bệnh không mong muốn.
Môi trường dùng cho nuôi cấy tế bào thường ở dạng thạch, chứa các chất dinh dưỡng hữu cơ, các hormone thực vật, các loại vitamin,… sao cho phù hợp với mục đích nuôi cấy.
Phòng thí nghiệm nuôi cấy mô thực vật
Một phòng thí nghiệm nuôi cấy mô thường bao gồm:
- Phòng rửa dụng cụ
- Phòng chuẩn bị môi trường, hấp tiệt trùng và chứa dụng cụ
- Phòng cấy vô trùng
- Phòng nuôi mẫu
- Phòng quan sát và thu nhận số liệu
Sơ đồ tổng quan như sau:
1. Phòng rửa và sản xuất nước cất
2. Phòng sấy hấp, kho thủy tinh sạch
3. Phòng chuẩn bị môi trường
4. Phòng chuẩn bị mẫu
5. Phòng cấy vô trùng
6. Phòng ảnh
7. Phòng kính hiển vi
8. Phòng nuôi
9. Phòng sinh hóa
Bên cạnh phòng thí nghiệm nuôi cấy mô cần có hệ thống nhà lưới và vườn ươm để trồng cây lấy nguyên liệu nuôi cấy và trồng cây tái sinh trong quá trình chọn lọc in vitro.
Phòng rửa và cất nước
Phòng rửa dụng cụ phải có bồn rửa lớn , có đường thoát nước riêng cho axit, có kệ để các thiết bị:
– Máy cất nước một lần
– Máy cất nước hai lần
– Máy sản xuất nước khử ion
Phòng sấy hấp
– Tủ sấy 60-600 oC (loại có dung tích lớn)
– Nồi áp suất loại nhỏ (20-30 lít)
– Nồi áp suất loại lớn (70-100 lít)
Phòng chuẩn bị môi trường
– pH meter
– Máy khuấy từ
– Cân phân tích 10-4 g
– Cân kỹ thuật 100-2 g
– Bếp điện
– Microwave
– Tủ lạnh 100-200 lít
– Tủ lạnh sâu (-20 đến -80 oC)
Phòng cấy vô trùng
Phòng cấy vô trùng nên là một phòng nhỏ, kín, sàn và tường cần được lát gạch men hoặc sơn để lau chùi và khử trùng thường xuyên. Cửa phòng cấy nên là cửa kính vì trong khi thao tác cấy rất dễ bị phụt đèn cồn do đó cần phải dễ liên lạc với bên ngoài trong lúc cần thiết. Trên tường gắn đèn UV để khử trùng phòng.
Có hai loại tủ cấy thường được sử dụng: tủ cấy tĩnh và tủ cấy thổi khí vô trùng. Trong tủ cấy phải có đèn trắng để dễ làm việc và có đèn UV để khử trùng trước khi làm việc.
– Quạt thông gió
– Đèn tử ngoại treo trần hoặc treo tường
– Thiết bị lọc không khí
– Giá và bàn để môi trường
– Bộ dụng cụ cấy, đèn cồn…
Phòng nuôi mẫu cấy
Tất cả các mẫu cấy đều được nuôi trong điều kiện nhiệt độ ánh sáng, độ ẩm, độ
dài chiếu sáng, độ thông khí thích hợp.
Phòng nuôi có nhiệt độ 15-30 oC tùy theo mẫu cấy và mục đích của thí nghiệm.
Nhiệt độ phải được phân bố đều trong toàn phòng nuôi, phải có đầy đủ ánh sáng huỳnh quang và có thể điều khiển được cường độ và thời gian chiếu sáng. Phòng thí nghiệm nuôi cấy mô phải được thổi khí đồng nhất và biên độ độ ẩm được điều chỉnh từ 20-98%.
– Phòng nuôi sáng: tường nên sơn màu trắng. Các giá đèn được lắp đèn ống để chiếu sáng. Trong phòng cần gắn các máy móc kiểm tra chính xác nhiệt độ, độ ẩm.
– Phòng nuôi tối để nuôi mô sẹo và các xử lí đặc biệt. Phòng cần tất cả các điều kiện như phòng sáng chỉ khác là không cần lắp đèn chiếu sáng cho cây, cửa sổ cần được che kín bằng vải đen.
– Các giàn đèn huỳnh quang nhiều ngăn, có độ chiếu sáng ở chỗ để bình nuôi cấy
từ 2000-3000 lux.
– Máy điều hòa nhiệt độ
– Máy lắc nằm ngang 100-200 vòng/phút
– Các thiết bị và dụng cụ nuôi cấy tế bào đơn
– Tủ ấm.
Phòng sinh hóa
Đây là một phần trong phòng thí nghiệm nuôi cấy mô dùng để tiến hành các phân tích sinh hóa, phân tử và di truyền.
– Tủ hút, tủ ấm
– Cân các loại
– Máy cắt tiêu bản
– Máy đo pH
– Ly tâm lạnh
– Máy điện di,
– Máy PCR, máy sắc kí, máy quang phổ
– Tủ lạnh thường, tủ lạnh âm sâu
– Lò vi sóng
– Pipet tự động các loại
– Máy soi và chụp ảnh gel
– Các tủ đựng hóa chất, tủ hút khí độc.
LƯU Ý: Các nhân tố đảm bảo thành công trong nuôi cấy mô tế bào thực vật: có 3 nhân tố chính:
– Đảm bảo điều kiện vô trùng trong phòng thí nghiệm nuôi cấy mô.
– Chọn đúng môi trường và chuẩn bị môi trường đúng cách.
– Chọn mô cấy và xử lí mô cấy thích hợp trước và sau khi cấy.
Nơi nào chuyên tư vấn, thiết kế và thi công phòng thí nghiệm?
Thương hiệu HUYlab với các sản phẩm Nội thất phòng thí nghiệm, Tủ an toàn sinh học, Tủ phân lập vô trùng, Tủ hút khí độc, Phòng sạch… Nhà máy sản xuất LABone hiện đại với diện tích 3,000 m2 được đặt tại Củ Chi với đầy đủ thiết bị công cụ hiện đại. Những điều đó đã giúp HUYlab luôn là lựa chọn hàng đầu của khách hàng khi muốn xây dựng phòng thí nghiệm.
Ngoài ra, HUYlab còn liên kết với Công ty Cổ phần Thiết bị và Hóa chất Đông Nam, đơn vị chuyên nhập khẩu và phân phối hóa chất, dụng cụ, thuốc thử, trang thiết bị trong phòng thí nghiệm của các hãng nổi tiếng thế giới. Chúng tôi tin chắc sẽ mang đến cho khách hàng những hỗ trợ tốt nhất và hoàn thiện nhất.
Liên hệ ngay với chúng tôi để nhận được tư vấn tốt nhất:
Công ty TNHH Thiết bị Khoa Học LABone
· Factory: 228/13/3 Nguyễn Thị Lắng, Xã Tân Phú Trung, Huyện Củ Chi, Tp.Hồ Chí Minh
· VP HCM: 23/30 Đường C1, Phường 13, Quận Tân Bình, Tp. Hồ Chí Minh
· VP HN: Số 1-Ngách 19/8 – Ngõ 19 – Phố Trần Quang Diệu, Ô Chợ Dừa, Đống Đa, Hà Nội
· Hotline: 0919 990 267
· Email: info@huylab.com
· Facebook: LABone Scientific Co.Ltd.,